バイオフィルム測定法

概要

試験菌液中で培養した試験片上に形成されたバイオフィルムの量を、クリスタルバイオレット染色により定量する方法です。
バイオフィルムが形成されにくい加工を施した試験片を評価します。また、試験菌液に液体や粉末の抗菌剤を加えて、試験片へのバイオフィルムの形成がどれほど抑えられるかを調べ、その効果を評価します。

試験方法の例

【例1】　＊ISO 4768を基にした方法

①30±2 mm四方の試験片を40±2 mm四方のガラス片に、角を合わせて接着し、滅菌容器に入れる。
②試験菌液を1/5TSBで調製する。
③試験片が浸かるように試験菌液を接種した後、培養する（例：35±1℃で48±1時間）。
④試験片を精製水で静かに洗い、0.1%クリスタルバイオレット水溶液で30分間染色する。
⑤再び試験片を精製水で静かに洗い、水溶性不織布（3 cm四方）で試験片表面を拭き取る。
⑥この水溶性不織布を5.0 mLの1.0%ドデシル硫酸ナトリウム水溶液に溶解させる。
⑦この液の590 nmにおける吸光度を分光光度計やマイクロプレートリーダーで測定する。
⑧必要に応じて、抗バイオフィルム活性値などを算出する。

【例2】

①試験菌液を適切な液体培地で調製する。
②試験片を試験菌液に浸漬し、培養する（例：30〜35℃、48時間）。
③培養後の試験片を精製水で静かに洗う。
④0.1%クリスタルバイオレット水溶液で30分間染色する。
⑤再び試験片を精製水で静かに洗う。
⑥エタノールを一定量添加してクリスタルバイオレットを溶出させる。
⑦この液の一定波長（例：570 nm）における吸光度を分光光度計やマイクロプレートリーダーで測定する。

＊試験菌液中に、液体や粉末の抗菌剤などを添加し、試験片へのバイオフィルム形成のしにくさを調べるような試験も可能でございます。

試験菌種の例

Staphylococcus epidermidis（表皮ブドウ球菌）、Brevundimonas diminuta　など

＊その他の菌種でも試験可能です。

参照する文書・規格の例

・ISO 4768 Measurement method of anti-biofilm activity on plastic and other non-porous surfaces（プラスチックなどの非多孔質表面における抗バイオフィルム活性の測定方法）

・2017年度SIAA委員会活動報告会　抗バイオフィルム試験法について

＊その他、参考にされたい文書などございましたらご相談ください。

試験実施にあたって必要な情報

お見積りにあたっては、下記のような情報を頂ければスムーズです。

・検体の種類数^※1
・ご希望の試験菌種
・要求される成果物^※2（和文報告書以外にあれば）

※1 試験片に抗菌加工したときの効果を評価したい場合は、原則として抗菌加工試験片・無加工試験片の両方をご準備ください。
※2 特にご要望がなければ、和文のご報告書（試験方法・試験結果を記載、画像なし）のみとなります。

納期

3週間～
＊詳しくはお問い合わせください。

費用

お問い合わせください。

その他試験方法のご案内

弊社では、さまざまな試験方法で試験を受託しております。
＊弊社で受託している主な抗菌性試験・抗カビ性試験の一覧
以下に挙げた以外にも試験実施が可能ですので、お気軽にお問い合わせください。